1.

農(nóng)殘試劑配置

緩沖溶液：

取一包緩沖劑，

加入

500ml

蒸餾水，

溶解攪拌均勻，

密閉、

避光、

陰涼處保存。

顯色劑：取顯色劑一瓶，加入

15ml

緩沖溶液溶解，

4

℃冰箱中保存。

底物：取底物一瓶，加入

15ml

蒸餾水溶解，

4

℃冰箱中保存。

乙酰膽堿酯酶：

取乙酰膽堿酯酶一瓶，

用

3ml

緩沖溶液溶解，

 4

℃冰箱中保

存。

2.

樣品處理

選取有代表性的蔬菜樣品，

擦掉樣品表面泥土，

剪成

1cm

見方碎片，

取樣品

1g

，放入燒杯或提取瓶中，加入

5ml

緩沖溶液，振蕩

1min

～

2min

，倒出提取液，

靜置

3min

～

5min

，待用。

注意：

樣品不可用水沖洗，

應(yīng)擦去表面泥土等雜物后取樣。

為了保證取樣具有代

表性，

葉菜一般取來自不同植株葉片的葉尖部樣本，

果菜從不同個體的表皮處取

樣。

3.

對照溶液測試

在提取瓶中加入

2.5ml

緩沖溶液，再加入

100ul

酶液、

100ul

顯色劑，搖勻

后于

37℃放置

15

分鐘

(

每批樣品的控制時間必須一致

)

。

15

分鐘后再加入

100

μ

L

底物搖勻

,

此時檢液開始顯色反應(yīng)

,

應(yīng)立即倒入

1cm

比色皿，放入儀器比色池中，

將儀器調(diào)到測量界面

,

按操作指示面板按鍵區(qū)的

“對照”

按鈕，

儀器開始做對照。

3

分鐘后儀器自動對照完成，對照完成后將對照樣取出，保持儀器界面不變。

注意：對照測試必須在*通道進(jìn)行，對照測試△

A

應(yīng)＞

0.3

，若對照測試

的結(jié)果小于以上數(shù)值時，儀器會自動提示“對照錯誤”

，須重新做對照，以保證

測量結(jié)果的準(zhǔn)確性。

(

對照測試△

A<0.3

的原因：一是酶的活性不夠，二是反應(yīng)

溫度太低。

)

4.

樣品溶液測試

另取干凈的提取瓶，放入

2.5ml

樣品提取液，加入

100ul

酶液、

100ul

顯色

劑，搖勻后于

37℃放置

15

分鐘

(

放置的時間與對照液放置的時間必須一致

)

。

15

分鐘后再加入

100

μ

L

底物搖勻

,

此時檢液開始顯色反應(yīng)

,

應(yīng)立即倒入

1cm

比色皿，

放入儀器比色池中，按操作指示面板按鍵區(qū)的“測量”按鈕開始測量，

3

分鐘后

儀器測量完成，顯示測量結(jié)果。結(jié)果以酶被抑制的程度（抑制率）表示，當(dāng)蔬菜

樣品提取液對酶的抑制率≥

50%

時，表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類

農(nóng)藥存在，樣品為陽性結(jié)果，陽性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗

2

次以上。

對陽性結(jié)果的樣品，可用其它方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。

5.

說明

蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有

影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時，可采取整株（體）蔬

菜浸提。對一些含葉綠素較高的蔬菜，也可采取整株（體）蔬菜浸提的方法，減

少色素的干擾。